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更新时间:2025-11-10
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JEG-3人绒癌细胞
JEG-3人绒癌细胞源自人类绒毛膜癌组织,是研究绒癌生物学特性、疾病机制及药物研发的专用体外模型,因保留绒癌典型病理特征与功能表型,在生殖系统肿瘤研究领域应用广泛。
该细胞呈上皮样形态,胞体多边形或不规则形,胞质丰富,细胞核大而圆,核仁清晰,体外培养以贴壁生长为主,呈片状或克隆样排列,无接触抑制特性,细胞融合度达 80%-90% 时仍可继续增殖。生长特性方面,其增殖活性较强,倍增时间约 36-48 小时,常规培养条件下可稳定传代,且能长期维持绒癌特异性功能 —— 可持续分泌人绒毛膜cu性腺激素(hCG),该激素水平与细胞活性正相关,可作为评估细胞功能状态的重要指标。分子表型上,细胞高表达上皮细胞标志物 CK7、CK18,同时表达绒癌相关抗原(如 hCGα/β 亚基),低表达间叶组织标志物 Vimentin,与临床绒癌患者肿瘤组织的分子特征高度一致,为疾病特异性研究提供可靠依据。
体外培养需精准控制环境与营养条件以维持细胞活性与功能:培养基shou选含高糖(4.5g/L D - 葡萄糖)的 DMEM/F12 混合培养基,添加 10%-12% 胎牛血清(FBS)提供生长必需的营养因子,可补充 1% 非必需氨基酸(NEAA)提升细胞代谢活性,培养基 pH 值需控制在 7.2-7.4,渗透压维持在 290-310 mOsm/kg;培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO?浓度及饱和湿度,CO?浓度波动≤±0.3%,温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降,出现大量悬浮死亡。传代操作时,当细胞融合度达 70%-80%,需用无菌 PBS 清洗 2 次去除残留血清,加入含 EDTA 的细胞消化液,37℃孵育 1-2 分钟至细胞间隙增大、形态变圆,加入含血清的培养基终止消化,吹打形成单细胞悬液后按 1:3-1:5 比例接种至新培养瓶,需避免消化过度损伤细胞,传代后 24 小时内避免频繁移动培养瓶,确保细胞稳定贴壁。
在科研与应用领域,该细胞具有多方面价值:其一,可用于绒癌发病机制研究,通过检测 hCG 分泌调控机制、探索 PI3K/Akt、MAPK 等信号通路异常对细胞增殖、侵袭的影响,为挖掘疾病诊断标志物与治疗靶点提供实验基??;其二,作为绒癌特异性靶细胞,可用于抗肿瘤药物筛选与疗效评估,通过 CCK-8 法、克隆形成实验测定药物对细胞增殖的抑制率,结合 ELISA 检测药物对 hCG 分泌的影响,评估药物活性与作用机制;其三,可用于激素调控研究,分析雌激素、孕激素等激素对细胞生长及功能的影响,为绒癌内分泌治疗策略优化提供数据支持;其四,可构建裸鼠皮下移植瘤模型,模拟体内绒癌生长过程,用于评估药物体内抑瘤效果,衔接体外实验与临床研究。
质量控制方面,合格细胞需满足多项标准:细胞活力≥90%(台盼蓝染色法检测),无细菌、真菌、支原体污染(支原体 PCR 检测阴性);免疫表型符合 CK7?CK18?Vimentin?特征,hCG 分泌水平稳定(培养上清中 hCG 浓度≥50 mIU/mL);染色体核型呈亚二倍体,无明显核型异常,增殖速率稳定(倍增时间 36-48 小时)。使用时需注意:传代次数建议控制在 40 代以内,超过上限可能导致 hCG 分泌能力下降、细胞功能退化;细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM/F12 冻存液,采用梯度降温法(4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存),复苏后需快速接种至预热培养基,静置培养 48 小时待细胞wan全贴壁后再更换培养基,避免早期换液影响细胞存活率;开展药物筛选或激素调控实验时,需确保细胞处于对数生长期,且每组设置 3 个复孔,减少实验误差,保证结果可靠性。
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