JH-2人纤维肉瘤细胞系

一、细胞基本生物学特性

JH-2人纤维肉瘤细胞系是从人类纤维肉瘤组织中分离建立的恶性肿瘤细胞模型，主要源自成人四肢深部软组织纤维肉瘤样本，因保留了纤维肉瘤的典型病理特征与恶性生物学行为，成为研究软组织肉瘤发病机制、药物研发的重要体外工具。

形态学上，该细胞呈典型的梭形或纺锤形，胞体细长，胞质丰富，细胞核呈椭圆形且位于细胞中央，体外培养时以贴壁生长为主，呈放射状或漩涡状排列，具备恶性肿瘤细胞的形态特征（如核仁明显、核质比增高）。生长特性方面，JH-2 细胞增殖活性较强，倍增时间约 36-48 小时，无接触抑制现象，当细胞融合度达 80%-90% 时仍可继续增殖，易形成细胞堆积；同时，该细胞具有一定的侵袭能力，在体外 Transwell 实验中可穿透基质胶，模拟体内肿瘤细胞的侵袭转移过程。此外，JH-2 细胞保留纤维肉瘤的分子特征，高表达纤维连接蛋白（FN）、波形蛋白（Vimentin）等间叶组织标志物，低表达上皮标志物（如 CK18），染色体核型呈亚二倍体，存在多个染色体片段缺失与易位，与临床纤维肉瘤患者的染色体异常特征高度相似。

二、体外培养关键条件

JH-2 细胞的体外培养需针对性调控环境与营养条件，以维持其贴壁生长特性与恶性表型：培养基选择上，shou选含高糖（4.5g/L D - 葡萄糖）的 DMEM 培养基，需添加 10%-12% 胎牛血清（FBS）提供生长必需的营养因子，同时可补充 1% 非必需氨基酸（NEAA）提升细胞活性，培养基 pH 值需控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 290-310 mOsm/kg；培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO?浓度及饱和湿度，培养箱内 CO?浓度波动需≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降，出现大量悬浮死亡。

传代与贴壁管理是培养核心：当细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代，操作前需用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，去除残留血清，再加入细胞消化液（含 EDTA），37℃孵育 2-3 分钟至细胞变圆脱落，加入含血清的培养基终止消化，吹打形成单细胞悬液后按 1:3-1:5 比例接种至新培养瓶；需注意避免消化过度导致细胞损伤，同时传代时需保证细胞密度不低于 2×10? cells/cm2，低密度接种会延长细胞贴壁时间。此外，该细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间稳定性高的胎牛血清，劣质血清会导致细胞形态异常（如胞体变圆、伪足减少），增殖速率下降 50% 以上。

三、核心科研应用领域

凭借与临床纤维肉瘤的高度相似性，JH-2 细胞在软组织肉瘤研究领域应用广泛：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 JH-2 细胞需通过严格质控：细胞活力需≥90%（台盼蓝染色法检测），无细菌、真菌、支原体污染（支原体 PCR 检测为阴性）；免疫表型需符合 Vimentin?、FN?、CK18?特征；染色体核型需与标准亚二倍体特征一致，且增殖速率稳定（倍增时间 36-48 小时）。

使用时需注意：传代次数建议控制在 40 代以内，超过上限可能导致细胞侵袭能力减弱、分子标志物表达异常；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM 冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏后需快速接种至预热的培养基中，静置培养 48 小时待细胞wan全贴壁后再更换培养基，避免早期换液影响细胞存活率；开展侵袭实验前需确保细胞处于对数生长期，以保证实验结果的重复性。