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更新时间:2025-11-27
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ACHN人肾腺癌细胞是源于人类肾透明细胞癌组织的永生化细胞系,1979年从一位43岁男性患者的转移灶中分离建立,因保留了肾癌的典型生物学特征及临床相关性,成为肾癌发病机制解析、药物敏感性评估及治疗靶点筛选的标准化工具,在肾癌基础研究与转化医学领域占据重要地位。
从核心生物学特性来看,ACHN细胞呈现典型的肾腺癌细胞形态,显微镜下可见细胞呈多角形或梭形,胞质透亮,部分细胞可见明显核仁,以贴壁方式生长,生长速度稳ding,群体倍增时间约为36-48小时。该细胞系具有较强的体外增殖活性与侵袭能力,传代至50代后仍能维持稳定的核型(染色体数目范围58-62条)及恶性表型,为长期实验研究提供了可靠保障。
标准化的培养条件是维持细胞特性的关键。ACHN细胞适宜在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中生长,添加1%广谱抗菌双抗以预防微生物污染,培养环境需严格控制为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱。传代时采用0.25%胰dan白酶-EDTA消化液进行温和消化,待细胞间隙增大、形态变圆时立即用含血清培养基终止消化,传代比例以1:3至1:4为宜,避免过度消化或细胞密度过高影响活性。
冻存与复苏的规范操作直接决定细胞复苏效率。冻存液采用含10%二甲基亚砜(DMSO)、20%胎牛血清的RPMI-1640培养基配制,细胞密度调整为1×10?-3×10?个/mL后,经4℃预冷30分钟、-20℃冷冻1小时、-80℃过夜保存的梯度降温流程,最终转入液氮长期储存。复苏时需将冻存管快速置于37℃水浴中震荡解冻(1分钟内完成),离心去除冻存液后用新鲜培养基重悬接种,细胞存活率可稳定在85%以上。
ACHN细胞的鉴定需结合形态学、分子标志物及功能特征综合判断。分子层面,高表达肾癌特异性标志物如碳酸酐酶IX(CAIX)、血管内皮生长因子(VEGF)及透明细胞癌相关基因VHL的突变型表达;功能层面,该细胞具有显著的体外侵袭与迁移能力,可通过Transwell实验模拟肾癌的转移过程,且对舒尼替尼等临床肾癌靶向药物具有明确的敏感性,为药物药效评价提供了参照标准。
在研究应用中,ACHN细胞的价值贯穿肾癌研究全链条。基础研究中,常用于解析肾癌发生发展的分子机制,如探索VHL-HIF-VEGF信号通路的异常激活机制及对细胞增殖的调控作用;转化研究中,是肾癌靶向药物与hua疗药物筛选的核心模型,助力新型药物的体外药效初筛与剂量优化;此外,该细胞系还可用于构建肾癌动物移植瘤模型,实现从体外细胞实验到体内动物实验的研究衔接,为临床治疗方案的制定提供实验依据。
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