C-33 A人子宫颈癌细胞

C-33 A人子宫颈癌细胞是1954年从65岁子宫颈鳞状细胞癌患者的病变组织中分离建立的上皮源性恶性肿瘤细胞系，其核心特性为不携带人乳头瘤病毒（HPV）基因组，这与临床中5%-10%的HPV阴性子宫颈癌病例高度吻合。该细胞能wen定复刻子宫颈鳞癌的典型病理表型，将其接种于裸鼠体内可形成结构完整的鳞癌移植瘤，因HPV阴性这一独特属性，成为研究非HPV相关子宫颈癌发病机制、hua疗耐药及靶向药物研发的稀缺实验模型，为攻克这类临床难治性子宫颈癌提供了关键支撑。

生物学特征上，C-33 A细胞呈现典型的子宫颈鳞癌细胞形态，以贴壁生长为主且排列紊乱无极性，显微镜下多为多角形，细胞边界清晰可辨，胞质丰富呈嗜酸性，约30%的细胞内可见角化颗粒，提示其保留部分鳞状上皮分化特征；细胞核大且形态不规则，核仁明显常为2-3个，核质比高达0.6，多核、病理性核分裂象等恶性标志频繁出现。细胞增殖活性wen定，群体倍增时间约28小时，传代周期为2-3天，无接触抑制现象，密集生长时会形成多层细胞集落。它高表达CK17、SCC-Ag等子宫颈鳞癌特异性标志物，在HPV阴性背景下，p53基因存在273位密码子点突变，导致抑癌功能wan全丧失，经STR鉴定遗传背景均一，无微生物污染，体外培养可长期维持恶性表型。

针对其上皮源性属性，培养时需采用适配的环境与培养基：常规使用含10%热灭活胎牛血清的DMEM高糖培养基，添加1%非必需氨基酸以优化代谢环境，培养条件控制在37℃、5%CO?及95%相对湿度。胎牛血清中含有的EGF、IGF等生长因子可激活细胞增殖信号通路，DMEM高糖配方则能满足子宫颈癌细胞高糖酵解的能量需求。传代操作时，先用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育4分钟，待细胞间隙增大后，立即用含血清的培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，按1:4比例接种至新培养基中，避免剧烈操作破坏细胞间的黏附结构。

在研究应用中，C-33 A细胞是解析HPV阴性子宫颈癌核心科学问题的关键工具。发病机制研究方面，通过基因编辑技术修复其p53突变位点，可明确该突变在细胞恶性转化中的驱动作用；同时可模拟吸烟、慢性宫颈炎症等危险因素，探究其诱导的DNA损伤及细胞癌变路径，为开发非HPV相关子宫颈癌的早期诊断标志物提供依据。耐药研究领域，因该细胞对临床常用hua疗药shun铂的耐药率达42%，常被用于构建耐药模型，分析ABC转运蛋白过表达、DNA修复基因ERCC1激活等耐药相关机制，为逆转耐药提供新靶点。

药物筛选中，该细胞的应用场景广泛：体外可通过CCK-8法检测药物IC50值，结合克隆形成实验评估药物对细胞的长期抑制效果，利用Transwell实验观察药物对细胞侵袭能力的干预作用；体内构建裸鼠皮下移植瘤模型时，其成瘤率达100%，可直观评估药物的体内抑瘤活性及安全性。使用过程中需注意三点：传代次数控制在50代以内，每10代通过免疫印迹验证p53突变状态及CK17表达wen定性；培养时保持胎牛血清批次一致，避免表型波动；实验需设置HPV阳性子宫颈癌细胞（如HeLa）作为对照，清晰凸显HPV阴性子宫颈癌的独特特征。作为该领域的标准化模型，C-33 A细胞为子宫颈癌精准医学研究提供了不可替代的实验基础。