Hs 578T人乳腺癌细胞源自人乳腺癌组织，贴壁生长呈梭形，具强恶性增殖与侵袭性，可用于乳腺癌发病机制、转移及耐药研究，也为抗乳腺癌药物筛选提供模型。

产品型号：

更新时间：2025-11-11

厂商性质：代理商

访问量：787

服务热线

021-34556080

立即咨询

产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

细胞/细菌培养试剂

血清细胞株

产品介绍

Hs 578T人乳腺癌细胞

一、细胞基本生物学特性

Hs 578T人乳腺癌细胞源自人乳腺癌组织（病理类型为三阴性乳腺癌，取自乳腺原发肿瘤灶），经体外原代分离、纯化及传代培养建立细胞株，是研究人类三阴性乳腺癌恶性生物学行为、发病机制及抗乳腺癌药物研发的核心体外模型。其完整保留了三阴性乳腺癌细胞的核心恶性特征与乳腺组织特异性表型，在模拟肿瘤增殖、乳腺间质侵袭及耐药性形成方面表现稳定，广泛应用于肿瘤学、乳腺病理学、药理学及临床转化医学研究领域。

形态上，该细胞呈典型上皮源性恶性肿瘤细胞形态，常规培养状态下以梭形、多边形为主，部分细胞呈不规则星形（胞体长 18-28μm，宽 12-20μm）；胞质丰富呈嗜酸性，可见较多颗粒状物质（为肿瘤细胞代谢旺盛的特征），部分细胞存在胞质突起（模拟乳腺癌细胞侵袭间质的形态）；细胞核大而不规则，多呈偏心位，核仁明显且数量增多（2-3 个），染色质分布不均（呈粗颗粒状或块状），核分裂象易见（正常培养条件下分裂象比例约 6%-9%）。体外培养以贴壁生长为核心特性，细胞接种后 24-36 小时内完成贴壁，初期排列疏松，随培养时间延长逐渐融合形成单层，且存在明显重叠生长现象（无接触抑制，体现恶性特征）；常规培养条件下可无限传代（具永生化特性），增殖速率快，倍增时间约 30-40 小时，传代后 48 小时内可恢复高效增殖活性（增殖率提升 3-4 倍）。

功能特性方面，Hs 578T 人乳腺癌细胞具备三阴性乳腺癌细胞的三大核心功能：一是强恶性增殖能力，细胞周期进程异常（G1 期缩短至 12 小时以下，S 期细胞比例升高至 40% 以上），可在低血清培养基（2% FBS）中维持增殖（正常乳腺上皮细胞在此条件下增殖停滞），对营养剥夺耐受性强（葡萄糖浓度降至 1.5g/L 时，增殖率仅下降 18% 左右）；二是高侵袭转移潜能，细胞可大量分泌基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9，降解乳腺基底膜与间质胶原），Transwell 侵袭实验中 24 小时穿膜细胞数达 100-150 个 / 视野（显著高于激素受体阳性乳腺癌细胞），划痕实验中 24 小时划痕愈合率达 80% 以上，可模拟体内乳腺癌细胞突破乳腺导管屏障、发生淋巴结转移的过程；三是三阴性表型特征，细胞不表达雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及人表皮生长因子受体 2（HER2），对激素治疗与 HER2 靶向治疗天然耐药，仅对部分抗肿 - 瘤药物敏感（易产生药物耐药），是研究三阴性乳腺癌耐药机制的理想模型。

分子表型上，该细胞高表达乳腺癌相关标志物：细胞角蛋白 19（CK19，阳性率 100%，上皮源性肿瘤特征标志物）、癌胚抗原（CEA，阳性率约 65%-75%）、波形蛋白（Vimentin，阳性率≥90%，反映间质表型与侵袭特性），其中 CK19?Vimentin?双阳性表型是其身份鉴定的核心依据；同时表达恶性肿瘤相关蛋白，包括增殖相关蛋白（Ki-67，阳性率≥85%）、侵袭相关蛋白（MMP-2、MMP-9）、耐药相关蛋白（ABCG2，介导抗肿 - 瘤药物外排）；细胞内存在三阴性乳腺癌相关异常激活的信号通路：PI3K/Akt/mTOR 通路（调控细胞存活与代谢重编程）、MAPK/ERK 通路（促进增殖与侵袭）、NF-κB 通路（调控炎症与耐药基因表达）；染色体核型为非整倍体（染色体数目 49-53 条，存在 1p 染色体缺失、8q 染色体扩增等三阴性乳腺癌典型核型异常），与临床三阴性乳腺癌患者肿瘤细胞的分子特征高度一致，确保实验结果的临床相关性与转化价值。

二、体外培养关键条件

Hs 578T 人乳腺癌细胞的体外培养需模拟乳腺肿瘤微环境特征，精准控制营养与环境参数，兼顾增殖需求与恶性表型维持：

培养基选择：增殖阶段优先使用 DMEM 高糖培养基（葡萄糖浓度 4.5g/L），添加 10% 胎牛血清（FBS，需选择低内毒素≤5 EU/mL、热灭活处理的产品）、1% 非必需氨基酸（NEAA），培养基 pH 值控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若需诱导特定功能状态（如药物耐药模型，可逐步提高目标抗肿 - 瘤药物浓度至 10nM，培养 3-4 周建立耐药亚株；侵袭增强模型，可添加 10ng/mL TGF-β1，48 小时后 MMP-9 表达量提升 2.5 倍以上）；开展药物干预实验时，需使用无血清培养基，药物作用时间为 48-72 小时（适应肿瘤细胞增殖特性）。

培养环境参数：温度稳定维持在 37℃（±0.5℃），CO?浓度控制在 5%（±0.3%），相对湿度 95% 以上；温度波动超过 ±1℃会导致细胞增殖速率下降 35% 以上，低温（<35℃）还会诱导细胞凋亡（凋亡率升高至 12% 以上）；CO?浓度异常会改变培养基 pH 值，当 pH<7.0 时细胞贴壁能力下降，pH>7.6 时胞质颗粒增多、核固缩现象增加，需及时调整环境参数。

传代操作要点：细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代（避免过度融合导致侵袭表型减弱），操作步骤如下：用无菌 PBS 快速清洗细胞 2 次（去除残留培养基与代谢废物），加入细胞消化液（覆盖培养皿底部即可），37℃孵育 1.5-2.5 分钟（显微镜下观察到细胞间隙增大、形态变圆即可终止），立即加入含血清培养基（体积为消化液的 5-10 倍）中和，用移液器轻柔吹打（沿培养皿壁圆周方向缓慢吹打，避免反复用力）形成单细胞悬液，按 1:4-1:5 比例接种至新培养皿；传代过程中需注意，消化时间不宜超过 3 分钟（否则细胞活性下降至 80% 以下），吹打力度需适中（过度吹打会破坏细胞表面黏附分子，影响后续侵袭实验结果）。

关键注意事项：细胞对血清质量敏感，需选择批次间一致性高的胎牛血清（同一实验使用同一批次），劣质血清会导致 Vimentin 表达量下降 45%、侵袭能力减弱 60%；培养器皿无需额外包被（细胞可通过自身黏附分子快速贴壁），但需确保培养皿表面洁净无划痕（划痕会影响细胞迁移路径，导致划痕实验结果偏差）；培养基需每周更换 2-3 次（因细胞代谢旺盛，易产生大量酸性代谢产物），避免培养基变黄后继续使用（pH<7.0 时会抑制细胞增殖）。

三、核心科研应用领域

依托与临床三阴性乳腺癌细胞的高度相似性及强恶性特征，Hs 578T 人乳腺癌细胞在科研领域具有重要价值：

三阴性乳腺癌恶性机制研究：可用于解析三阴性乳腺癌增殖、侵袭及耐药的分子机制，如探索 PI3K 抑制剂对细胞周期的调控作用（抑制剂处理后 G1 期细胞比例升高至 55% 以上，S 期比例下降）、MMP-9 沉默对侵袭能力的影响（Transwell 穿膜细胞数减少 70% 以上）、ABCG2 蛋白对药物外排的机制（检测 ABCG2 抑制剂维拉帕米对目标抗肿 - 瘤药物 IC50 值的影响，可使 IC50 降低 60% 左右）；通过基因编辑技术（siRNA、CRISPR/Cas9）研究三阴性乳腺癌驱动基因（如 BRCA1、TP53 突变体）对细胞恶性表型的调控作用，为挖掘疾病驱动机制提供实验依据。

三阴性乳腺癌疾病模型构建：可构建多种临床相关模型：①药物耐药模型（通过逐步提高药物浓度建立耐药亚株，耐药指数达 4.0，用于研究耐药形成机制）；②肿瘤微环境模型（与乳腺成纤维细胞、巨噬细胞共培养，模拟体内肿瘤 - 微环境相互作用，观察微环境细胞对乳腺癌细胞侵袭能力的促进作用）；③转移模型（通过尾静脉注射建立裸鼠肺转移模型，成瘤率≥85%，用于研究体内转移机制）；通过检测模型中标志物（如耐药相关蛋白 ABCG2、转移相关基因 Twist1）的表达变化，为三阴性乳腺癌耐药、转移的临床干预提供靶点。

抗三阴性乳腺癌药物筛选与评价：可用于高通量筛选抗三阴性乳腺癌候选药物，涵盖多种类型：①抗肿 - 瘤药物的新剂型或联合用药方案，通过 MTT 法检测增殖抑制率，计算 IC50 值（评价药物敏感性）；②靶向药物（如 PI3K 抑制剂、PARP 抑制剂），通过 Western Blot 检测靶点蛋白磷酸化水平（评价药物作用效果），流式细胞术检测细胞凋亡率（评价药物诱导凋亡能力）；③中药活性成分（如槲皮素衍生物、姜黄素类似物），通过 Transwell 实验检测侵袭抑制作用（如姜黄素类似物浓度为 25μM 时，穿膜细胞数减少 75% 以上）；同时可用于耐药逆转研究，如筛选 ABCG2 抑制剂（如槲皮素），观察其对耐药细胞 IC50 值的降低效果（逆转倍数达 2-3 倍），为临床耐药患者治疗提供新策略。

三阴性乳腺癌诊断与预后研究：可用于挖掘三阴性乳腺癌诊断标志物，如通过蛋白质组学技术筛选 Hs 578T 细胞与正常乳腺上皮细胞的差异表达蛋白（如发现血清中 CA15-3、CEA 的分泌水平显著升高，可作为诊断候选标志物）；通过 CRISPR/Cas9 技术敲除候选治疗靶点（如 MMP-9、PI3K），观察细胞恶性表型变化（如敲除 MMP-9 后，细胞侵袭能力下降 85%，体内移植瘤生长减缓 60%），验证靶点临床价值；还可用于预后评估研究，如检测细胞中耐药蛋白、转移相关基因的表达水平，分析其与临床患者预后（如生存期、复发率）的相关性，为三阴性乳腺癌患者个体化治疗方案制定提供参考。

四、质量控制与使用注意事项

（一）质量控制标准

合格的 Hs 578T 人乳腺癌细胞需满足以下指标：

细胞活力：台盼蓝染色法检测活力≥90%（死细胞比例 < 10%）；

微生物污染检测：PCR 法或培养法检测无细菌、真菌、支原体、病毒（如 HIV、HBV、EBV）污染（肿瘤细胞长期培养易受支原体污染，需定期检测）；

身份鉴定：①免疫荧光染色验证 CK19?Vimentin?CEA?表型，阳性率≥90%；②短串联重复序列（STR）分型检测，与标准 Hs 578T 细胞 STR 图谱一致性≥95%（避免细胞交叉污染）；③激素受体检测：ER、PR、HER2 表达阴性（符合三阴性表型）；

功能指标：①增殖特性：倍增时间稳定在 30-40 小时，Ki-67 阳性率≥85%；②侵袭能力：Transwell 实验 24 小时穿膜细胞数≥100 个 / 视野；③耐药性：对常用抗肿 - 瘤药物的 IC50 值≥15nM（符合三阴性乳腺癌耐药特征）；

核型分析：染色体数目 49-53 条，存在三阴性乳腺癌典型核型异常（如 1p 缺失、8q 扩增）。

（二）使用注意事项

培养操作：①细胞培养需在生物安全柜中进行（符合生物安全二级标准），操作前后用 75% 乙醇消毒台面；②避免频繁传代（建议每 2-3 天传代 1 次，过度传代可能导致细胞恶性表型改变，如侵袭能力下降）；③培养过程中需定期观察细胞形态（每周至少观察 3 次），若发现细胞出现大量漂浮、核固缩等异常现象，需及时更换培养基或重新复苏细胞；

功能实验要点：①开展侵袭实验时，Transwell 小室需用 Matrigel 胶（浓度 50μg/mL）包被，37℃孵育 4 小时使其凝固（模拟乳腺基底膜结构）；②药物敏感性实验中，药物需用无血清培养基稀释（避免血清成分与药物结合影响药效），且设置 5 个以上浓度梯度，确保 IC50 值计算准确性；③激素受体检测需采用免疫印?；蛄魇较赴酰ū苊饷庖咦榛僖跣越峁?，确认三阴性表型稳定性；

细胞冻存与复苏：①冻存需选择对数生长期细胞（活力≥95%），冻存液配方为 DMEM 高糖培养基 + 10% DMSO+20% FBS，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），冻存密度为 1×10?-2×10?cells/mL；②复苏时在 37℃水浴中 1-2 分钟内快速融化，立即加入 5 倍体积含血清培养基（稀释 DMSO 降低毒性），1000rpm 离心 5 分钟弃上清，接种后 24 小时内不更换培养基（让细胞充分贴壁恢复活性）；

实验设计原则：①进行药物筛选或机制研究时，需设置空白对照组、溶剂对照组、阳性对照组（如常用抗肿 - 瘤药物，浓度 10nM），每组至少 3 个复孔，重复实验 3 次以上；②因细胞具永生化特性，长期培养后可能出现表型漂移（如耐药性增强），建议每 6 个月从液氮中复苏早期传代细胞（如 P10-P20 代），确保实验结果一致性；③开展体内移植瘤实验时，需选择免疫缺陷小鼠（如裸鼠、NOD/SCID 小鼠），接种细胞密度为 2×10?cells / 只（确保成瘤率≥90%），定期测量肿瘤体积（每周 2 次），分析药物对肿瘤生长的抑制作用。

上一个：人B细胞淋巴瘤因子2试剂盒