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更新时间:2025-12-05
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BT-549人乳腺癌细胞是三阴性乳腺癌研究领域的核心人源细胞系,1977年从一名72岁女性浸润性导管癌患者的胸壁转移灶组织中分离建立,隶属于基底样型乳腺癌细胞系。作为三阴性乳腺癌研究的经典模型,该细胞系因稳定保留肿瘤的典型恶性特征、明确的分子表型及强大的体内外活性,成为解析该病发病机制、开发治疗策略及临床转化研究的重要实验工具。
生物学特性上,BT-549细胞呈现梭形与多角形的混合形态,体外培养以贴壁生长为主,部分细胞呈纤维样外观,排列松散且细胞边界不清,核质比显著升高,核仁大而明显,胞质内可见较多嗜酸性颗粒。其最核心的分子标志是典型三阴性表型——雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)免疫组化检测阴性,人表皮生长因子受体2(HER-2)无基因扩增及蛋白过表达,这与临床约15%-20%的三阴性乳腺癌患者特征wan全契合。同时,该细胞高表达基底细胞标志物CK5/6、CK14及表皮生长因子受体(EGFR),并富集CD44?/CD24?表型的肿瘤干细胞亚群,增殖活性旺盛,倍增时间约36-48小时,且具备ji强的体外侵袭和迁移能力,Transwell实验中穿透基质膜的细胞数量显著高于MCF-7等管腔型乳腺癌细胞系。
体外培养BT-549细胞需精准调控环境与营养条件,zui适培养环境为37℃、5% CO?的恒温恒湿培养箱,推荐使用添加10%胎牛血清(FBS)、1%抗菌药物混合液的RPMI 1640培养基,额外添加2mM氨基戊二酸可有效维持细胞的增殖活性与表型稳定性。培养过程中需密切监测细胞状态,当融合度达到60%-70%时必须及时传代,避免过度融合导致细胞出现上皮-间质转化(EMT)表型增强。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化3-4分钟,镜下观察到细胞间隙增大、形态变圆后,立即加入wan全培养基终止消化,轻柔吹打制成单细胞悬液,传代比例以1:2-1:4为宜。需特别注意,该细胞贴壁能力中等,消化后若静置时间过长易发生聚集,且培养基需每2天更换一次,防止乳酸等代谢废物积累抑制细胞增殖。
研究应用中,BT-549细胞的价值具有鲜明针对性。肿瘤生物学领域,其基底样表型与干细胞特性可用于探究三阴性乳腺癌的细胞起源、EMT进程与侵袭转移的分子关联,以及肿瘤干细胞自我更新的调控通路(如Wnt/β-catenin通路);药物研发方面,该细胞系是三阴性乳腺癌治疗药物的核心筛选平台,可通过CCK-8法、划痕愈合实验等评估hua疗药物(如zi杉醇)、PARP抑制剂(如奥拉帕利)及PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂的疗效;分子机制研究中,利用其高表达EGFR的特征,可深入分析EGFR-MAPK信号通路异常激活在肿瘤恶性进展中的作用及靶向干预策略。此外,BT-549细胞具有ji强的裸鼠成瘤能力和肺转移潜能,皮下接种后2-3周即可形成可测量肿瘤,尾静脉接种4-6周可观察到明显肺转移灶,为体内药效验证及转移机制研究提供了理想模型。
需注意的是,BT-549细胞仅代表基底样型三阴性乳腺癌,无法wan全模拟免疫调节型等其他三阴性乳腺癌亚型的生物学特征,实验结论需结合MDA-MB-231等不同背景细胞系交叉验证。但凭借明确的三阴性表型、稳定的生物学性能及与临床的高度关联性,BT-549细胞仍是三阴性乳腺癌研究中不ke或缺的标gan细胞系,持续为该病的基础理论突破与临床治疗革新提供关键支撑。
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