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产品型号:试剂盒
更新时间:2025-11-19
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细胞/细菌培养试剂
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FIP293人胚胎肾细胞
FIP293人胚胎肾细胞是生物医学研究,特别是分子生物学和生物技术领域中一款至关重要且广泛使用的工具细胞。要深入理解它,我们需要从其起源、特性、应用以及培养要点等多个维度进行剖析。
FIP293细胞的基石是著名的HEK293细胞系。该细胞系于1973年由荷兰科学家Alex Van der Eb通过腺病毒DNA片段转化原代培养的人胚胎肾细胞而获得?!癋IP"这一前缀通常具有特定含义,它可能指代:
Flp-In™ System: 赛默飞世尔科技公司开发的一种用于在哺乳动物细胞中实现定点、稳定整合外源基因的技术平台。
或其他特定载体系统(如带有Furin蛋白酶切位点与P2A肽的载体)。
因此,FIP293细胞本质上是经过基因工程改造的HEK293细胞,其基因组中预先整合了特定的重组酶系统(如Flp重组酶)的接受位点。这种设计使得研究人员能够将目的基因高效、稳定且单拷贝地整合到细胞基因组的特定位点,从而消除了传统转染方法中基因随机整合带来的表达水平不一和位置效应问题,确保了实验结果的均一性和可重复性。
高效的蛋白表达与分泌能力: 继承了HEK293细胞的优点,FIP293细胞能够高效地转录和翻译外源基因,并具备哺乳动物细胞正确的蛋白质折叠、组装和翻译后修饰(如糖基化、磷酸化)能力,能生产出在结构和功能上更接近天然人类蛋白的重组蛋白。
快速生长与高转染效率: 该细胞为贴壁细胞,但部分亚系也可适应悬浮生长,增殖迅速。它们对多种转染方法(如磷酸钙、脂质体、电转)都非常敏感,易于进行基因操作。
定点整合与稳定表达: 这是FIP293系统最核心的优势。通过Flp-In技术,可以快速获得稳定表达目的蛋白的细胞株,而非瞬时表达,这对于需要大量、长期生产蛋白或病毒的应用至关重要。
卓yue的病毒包装能力: HEK293系列细胞(包括其衍生株如HEK293T)是生产慢病毒、腺相关病毒等病毒载体的“黄金标准"宿主。FIP293细胞同样具备这一能力,并能用于构建稳定生产病毒载体的包装细胞系。
FIP293细胞的多功能特性使其在多个前沿研究领域大放异彩:
重组蛋白生产: 广泛用于生产治疗性抗体、细胞因子、激素、酶和病毒抗原等,为药物筛选、结构生物学研究和体外诊断试剂开发提供关键原料。
病毒载体包装: 在基因治疗和细胞治疗领域,是生产临床级及研究用慢病毒、腺相关病毒载体的核心工具。其稳定整合系统有助于提高病毒滴度和批次间一致性。
基因功能研究: 通过将特定基因(如受体、离子通道、信号分子)定点整合到FIP293细胞中,可以建立高度均一的过表达模型,用于研究基因功能、信号通路、药物靶点鉴定以及高通量药物筛选。
稳定细胞系构建: 相较于传统方法,利用FIP293/Flp-In系统构建稳定表达目的蛋白的细胞系,周期更短、成功率更高、表达更稳定,极大地提高了科研效率。
培养基: 通常使用高糖DMEM或MEM培养基,并添加10%胎牛血清、青mei素-链mei素双抗。对于悬浮培养适应株,则需要使用无血清悬浮培养基。
培养条件: 标准条件为37°C,5% CO?的湿润培养箱中。
传代: 细胞贴壁生长,达到80-90%密度时即可传代。使用胰dan白酶消化后,按适当比例(通常为1:3至1:10)分盘。
基因操作: 在进行Flp-In重组时,需要将含有目的基因的FRT质粒与表达Flp重组酶的质粒共转染细胞,随后通过抗生素(如潮霉素)进行筛选,以获得稳定整合的细胞池或单克隆。
上一个:试剂盒T-2毒素试剂盒
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